本品系用莱克多巴胺（RACT）偶联蛋白的抗原、莱克多巴胺单克隆抗体和酶标记羊抗鼠及其它试剂制成。用于定量、定性检测尿样、猪组织中莱克多巴胺的残留量。
【物理性状】 试剂盒外观完整，内装试剂齐全。包被抗原的酶联板透明干燥且用真空包装，莱克多巴胺浓缩抗体溶液、底物液、终止液、标准品溶液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液为透明溶液，酶标记物为浅黄色溶液，试剂无菌检验均应合格。
【灵敏度测定】 取已包被好的酶标板12孔，每两孔分别加入0µg/L、0.5µg/L、1.5µg/L、4.5µg/L、13.5µg/L、40.5µg/L标准溶液各50µL，再加入已稀释好的RACT抗体50µL，25℃反应60min，取出洗板5次，拍干，加入100µL酶标二抗，25℃反应30 min，取出洗板5次，拍干。加入底物液各50µL，避光25℃反应15~30 min，用50µL终止液终止反应，置450nm波长处测定吸光度值。每一浓度标准溶液吸光度值（B）平均值除以第一个标准（0标准）吸光度值（B0）的平均值再乘以100%，即百分吸光度值。以RACT浓度（µg/L）的自然对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。
IC50（即0浓度标准溶液的吸光度值50％处所对应的RACT浓度）范围应在1.9µg/L ~3.2µg/L之间。
【特异性测定】 取已包被好的酶标板18孔，每两孔分别加入0µg/L、0.5µg/L、1.5µg/L、4.5µg/L、13.5µg/L、40.5µg/L标准溶液和阴性尿液提取液、5µg/L、10µg/L 两个浓度RACT添加的阳性尿样本提取液各50µL，再加入已稀释好的RACT抗体50µL，25℃反应60 min，取出洗板5次，拍干，加入100µL酶二抗，25℃反应30 min，取出洗板5次，拍干。加入底物液(A液、B液)各50µL，避光25℃反应15~30 min，用50µL终止液终止反应，置450nm波长处测定吸光度值。每一浓度标准溶液吸光度值（B）平均值除以第一个标准（0标准）吸光度值（B0）的平均值再乘以100%，即百分吸光度值。以RACT浓度（µg/L）的自然对数为X轴，百分吸光度为Y轴，绘制标准曲线图。从标准曲线中查出阴性样品尿样品和5µg/L 、10µg/L两个浓度 RACT添加的尿样品的测定浓度。
阴性尿样品测定值在1.0µg/L以下，5µg/L、10µg/L 两个浓度RACT尿样品添加回收率应在60.0%~105.0％以上。
【精密度测定】 取已包被好的酶标板32孔，每两孔分别加入0µg/L、0.5µg/L、1.5µg/L、4.5µg/L、13.5µg/L、 40.5µg/L标准溶液50µL，其它20孔加入4.5µg/L的标准溶液50µL，再加入已稀释好的RACT抗体50µL，25℃反应60 min，取出洗板5次，拍干，加入100µL酶标二抗，35℃反应30 min，取出洗板5次，拍干。加入底物液各50µL，避光25℃反应15~30 min，用50µL终止液终止反应，置450nm波长处测定吸光度值。
20个微孔的4.5µg/L标准溶液的光吸收值变异系数（%）应≤25%（n=20）
【适用范围】 用于定量、定性检测尿样和猪组织（肌肉、肝脏等）中莱克多巴胺的残留量。
【用法和结果判定】
1. 溶液配制
1.1 1M NaOH：称NaOH 4g，去离子水100mL
1.2 稀释复溶液：将5X浓缩复溶液摇匀，用去离子水以1：5的比例稀释，临用前配制。
1.3 稀释洗涤液：将20X浓缩洗涤液摇匀，用去离子水以1：20的比例稀释，临用前配制。
1.4 抗体稀释液： 将抗体浓缩液摇匀，用稀释了的复溶液将抗体按1：11倍稀释(500mL复溶液+50uL抗体)，临用前配制。
2. 样品前处理
2.1 猪组织（肌肉、肝脏等）样本处理方法
2.1.1取猪组织（肌肉、肝脏等）进行均质。
2.1.2称取组织（3g±0.1）g ，先加入无水乙腈9mL，再加入2g无水Na2SO4，充分振荡10min；
2.1.3取上清液4mL，氮气流下吹干；
2.1.4加入（buffer 1）1mL混合后，加入3mL异丁醇和1g无水Na2SO4，振荡萃取5min，3000g以上，离心5min，取出上层有机相，氮气流下吹干；
2.1.5用1mL 已稀释了的复溶液溶解。
肉样本取100mL提取液加100mL稀释后的复溶液。
肝样本取50mL提取液加150mL稀释后的复溶液。
2.1.6取50mL进行分析。
2.2 尿样本处理方法
2.2.1 1mL尿样用1MNaOH调节pH至10~11后，加入1g无水Na2SO4，再用3mL乙酸乙酯-丙酮（3：1；V/V）振荡提取3000g以上离心5min（或静置分层）；
2.2.2 取1.5mL有机相在氮气流下吹干;
2.2.3 用1mL 已稀释了的复溶液溶解。
2.2.4 取50mL进行分析。
3. 检测步骤
3.1 将试剂从4℃冷藏环境中取出并将所需试剂从盒中取出，置于室温（20~24℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
3.2 取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2~8℃，不要冷冻。
3.3 编号：将样品和标准品对应微孔按序编号，每个样品和标准品均需做2孔；
3.4 反应：往酶标板微孔中加入加标准品溶液或样本溶液50mL 后，每孔再加50mL稀释后的莱克多巴胺抗体溶液，用盖板膜盖板后置于25℃环境反应60min；
3.5 小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液每孔250mL充分洗涤4~5次，每次间隔15－30秒，用吸水纸拍干；
3.6 加酶标记物：每孔加入100mL。用盖板膜盖板后置25℃环境反应30min，取出重复洗板步骤。
3.7 显色：每孔加入底物液A液50mL，再加底物液B液50mL，轻轻振荡混匀25℃环境避光显色15~30min。
3.8 测定：每孔加入终止液50mL，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测），测定每孔OD值。
4. 结果判定
所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值除以第一个标准（0标准）的吸光度值再乘以100%，即百分吸光度值。
以RACT浓度的自然对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。相对应每一个样品的浓度可以从标准曲线上读出。也可以用回归方程法，计算出样本溶液浓度。利用计算机专业软件，更便于大量样品的快速分析。
【贮藏条件和保存期】试剂盒应在2~8℃保存，保存期为6个月。
【规格】 每个试剂盒含96孔板一块;RACT标准品溶液6瓶，1mL/瓶（0µg/L、0.5µg/L、1.5µg/L、4.5µg/L、13.5µg/L、 40.5µg/L）; RACT浓缩抗体1瓶，0.8mL；酶标二抗工作液1瓶，12mL； 20倍浓缩洗涤液1瓶，40 mL；5倍浓缩复溶液1瓶，50mL；底物液A液1瓶，7m；底物液B液1瓶,7mL；终止液1瓶，7mL；高浓度标准品（1µg/ mL）1瓶，1mL；盖板膜1张，自封袋1个；说明书1份；质量报告1
