农业部文件
关于印发《高致病性禽流感疫情
处置技术规范(试行)》的通知
《高致病性禽流感疫情处置技术规范(试行)》已经2004年2月2日农业部第7次常务会议审议通过,现印发你们,请遵照执行。
二○○四年二月二日
第一项 样品采集、保存及运输技术规范
第二项 血清学诊断技术规范
(一)材料准备
(二)操作方法
1.血凝(HA)试验(微量法)
(6)振荡混匀,在室温(20℃-25℃)下静置40min后观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下1hr)。对照孔红细胞将成明显的钮扣状沉到孔底。
2.血凝抑制(HI)试验(微量法)
以完全抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度。
只有阴性对照孔血清滴度不大于21og2,阳性对照孔血清误差不超过1个滴度,试验结果才有效。HI价小于或等于31og2判定HI试验阴性;HI价等于41og2为阳性。
二.琼脂凝胶免疫扩散(AGID)试验
(一)材料准备
4.作用。加样完毕后,静置5min~10min,然后将平皿轻轻倒置放入湿盒内,37℃温箱中作用,分别在24h、48h和72h观察并记录结果。
(1)若被检血清孔(如图1中的②号)与中心抗原孔之间出现清晰致密的沉淀线,且该线与抗原与标准阳性血清之间沉淀线的末端相吻合,则被检血清判为阳性。
(2)被检血清孔(如图1中的③号)与中心孔之间虽不出现沉淀线,但标准阳性血清孔(如图1中的④号)的沉淀线一端向被检血清孔内侧弯曲,则此孔的被检样品判为弱阳性(凡弱阳性者应重复试验,仍为弱阳性者,判为阳性)。
(3)若被检血清孔(如图1中的⑤号)与中心孔之间不出现沉淀线,且标准阳性血清沉淀线直向被检血清孔,则被检血清判为阴性。
(4)被检血清孔(如图1中的⑥号)与中心抗原孔之间沉淀线粗而混浊或标准阳性血清与抗原孔之间的沉淀线交叉并直伸,被检血清孔为非特异反应,应重做,若仍出现非特异反应则判为阴性。
图1AGP试验结果
葡萄糖2.05g
柠檬酸钠0.8g
柠檬酸0.055g
氯化钠0.42g
加蒸馏水至100mL,加热溶解后调pH值至6.1,69kPa15min高压灭菌,4℃保存备用。
附录B
硫柳汞1.0g
加蒸馏水至100mL
称量琼脂糖1.0g,加入100mL的pH7.2的0.01mol/LPBS液,在水浴中煮沸使之充分融化,加入8g氯化钠,充分溶解后加入1%硫柳汞溶液1mL,冷至45℃-50℃时,将洁净干热灭菌直径为90mm的平皿置于平台上,每个平皿加入18mL-20mL,加盖待凝固后,把平皿倒置以防水分蒸发,放普通冰箱中保存备用(时间不超过2周)。
第三项 高致病性禽流感诊断标准
第四项 封锁技术规范
第五项 扑杀技术规范
第六项 无害化处理技术规范
以上处理应符合环保要求,所涉及到的运输、装卸等环节要避免洒漏,运输装卸工具要彻底消毒。
第七项疫区清洗消毒技术规范
第八项散养户养殖场地和禽舍消毒技术要求
一、扑杀鸡鸭等禽鸟后,场地必须清洗消毒。
第九项扑杀禽鸟工作人员防护技术要求
第十项赴疫区调查采访人员防护技术要求
第十一项饲养人员防护技术要求